MARC

 008260219s2025        us  ||||||||||||||c||eng  d
■001000017359340
■00520260202105105
■006m          o    d                
■007cr#unu||||||||
■020    ▼a9798293893423
■035    ▼a(MiAaPQ)AAI32236520
■040    ▼aMiAaPQ▼cMiAaPQ
■0820  ▼a540
■1001  ▼aVazquez  Maldonado,  Angel  Luis.
■24510▼aEngineering  Cell-Permeant  Mini-Proteins  With  Enhanced  Endosomal  Escape  for  the  Delivery  of  Active  Therapeutics.
■260    ▼a[S.l.]▼bUniversity  of  California,  Berkeley.  ▼c2025
■260  1▼aAnn  Arbor▼bProQuest  Dissertations  &  Theses▼c2025
■300    ▼a125  p.
■500    ▼aSource:  Dissertations  Abstracts  International,  Volume:  87-04,  Section:  B.
■500    ▼aAdvisor:  Schepartz,  Alanna.
■5021  ▼aThesis  (Ph.D.)--University  of  California,  Berkeley,  2025.
■520    ▼aThe  therapeutic  potential  of  biologics  remains  largely  constrained  by  the  inability  to  efficiently  deliver  proteins  into  the  cytosol,  where  many  critical  therapeutic  targets  reside.  This  dissertation  addresses  this  fundamental  challenge  by  engineering  and  characterizing  cell-permeant  mini-proteins  (CPMPs)  with  enhanced  endosomal  escape  properties,  and  by  developing  chemical  tools  to  elucidate  their  intracellular  trafficking  mechanisms.In  the  first  part  of  this  work,  a  structure-guided  approach  was  used  to  generate  AV5.3,  a  rationally  engineered  derivative  of  the  mini-protein  ZF5.3.  AV5.3  exhibits  early  endosomal  escape  through  pH-triggered  unfolding  and  achieves  efficient  cytosolic  delivery  of  enzymatic  cargos  with  reduced  exposure  to  lysosomal  degradation.  Notably,  AV5.3  successfully  delivered  active  dihydrofolate  reductase  (DHFR),  rescuing  DHFR-deficient  mammalian  cells  and  demonstrating  its  potential  as  an  enzyme  replacement  therapy.The  second  portion  of  this  thesis  demonstrates  that  ZF5.3  can  be  used  to  deliver  RAS-binding  monobodies  into  the  cytosol  of  cancer  cells,  where  they  retain  functional  activity.  This  work  expands  the  utility  of  CPMPs  for  targeting  undruggable  intracellular  proteins  and  highlights  their  compatibility  with  chemically  sensitive  and  functionally  diverse  cargo  proteins.Finally,  a  novel  photocatalytic  proximity  labeling  platform  was  used  to  investigate  the  mechanisms  of  ZF5.3  uptake.  By  conjugating  ZF5.3  to  a  blue-light-activated  iridium  photocatalyst,  we  aimed  to  map  the  proteins  in  close  proximity  to  ZF5.3  during  endocytic  trafficking.  While  proteomic  analysis  confirmed  engagement  with  clathrin-mediated  pathways,  limited  reproducibility  across  replicates  revealed  the  need  for  orthogonal  methods  and  next-generation  labeling  platforms  with  improved  specificity.Together,  this  work  presents  a  comprehensive  strategy  for  improving  the  cytosolic  delivery  of  therapeutic  proteins  through  protein  engineering  and  mechanistic  interrogation.  These  advances  provide  a  strong  foundation  for  developing  next-generation  delivery  platforms  and  for  targeting  currently  inaccessible  intracellular  disease  pathways.
■590    ▼aSchool  code:  0028.
■650  4▼aChemistry.
■650  4▼aMolecular  biology.
■650  4▼aCellular  biology.
■650  4▼aBiochemistry.
■653    ▼aDelivery
■653    ▼aEscape
■653    ▼aMicroscopy
■653    ▼aPeptides
■653    ▼aProteins
■653    ▼aTherapeutics
■690    ▼a0485
■690    ▼a0307
■690    ▼a0379
■690    ▼a0487
■71020▼aUniversity  of  California,  Berkeley▼bChemistry.
■7730  ▼tDissertations  Abstracts  International▼g87-04B.
■790    ▼a0028
■791    ▼aPh.D.
■792    ▼a2025
■793    ▼aEnglish
■85640▼uhttp://www.riss.kr/pdu/ddodLink.do?id=T17359340▼nKERIS▼z이  자료의  원문은  한국교육학술정보원에서  제공합니다.

미리보기

내보내기

chatGPT토론

Ai 추천 관련 도서